1 前言

试样经除去蛋白质后，以亚甲蓝作指示剂，在加热条件下滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液(已用还原糖标准溶液标定)，根据样品液消耗体积计算还原糖含量。

2 仪器与试剂

2.1 仪器

Hanon T960全自动电位滴定仪，Hamilton高温铂复合电极，10ml滴定管单元，电陶炉

2.2 试剂

相关配制见附录。

盐酸溶液（1+1），碱性酒石酸铜甲液，碱性酒石酸铜乙液，乙酸锌溶液，亚铁氰化钾溶液(106g/L)，氢氧化钠溶液(40g/L)，葡萄糖标准溶液(1.0mg/mL) 

3 实验方法

3.1 实验步骤

（1）样品前处理

称取牛奶25g，(精确至0.001g)，移置250mL容量瓶中，加50mL水，缓慢加入乙酸锌溶液5mL和亚铁氰化钾溶液5mL，加水至刻度，混匀，静置30min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，取后续滤液备用。

（2）碱性酒石酸铜溶液的标定

吸取碱性酒石酸铜甲液5.0mL和碱性酒石酸铜乙液5.0mL，置于滴定杯中。加水10mL，加入葡萄糖标准溶液9mL，将电陶炉设为内环火500℃，控制在2min中内加热至沸，然后调至300℃，趁热以1滴/2s的速度继续滴加葡萄糖标准溶液直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录消耗葡萄糖的总体积，同时平行操作3份，取其平均值，计算每10mL(碱性酒石酸甲、乙液各5mL)碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖(或其他还原糖)的质量(mg)。 

（3）试样溶液测定

吸取碱性酒石酸铜甲液5.0mL和碱性酒石酸铜乙液5.0mL，置于滴定杯中，加水10mL，预先加入2mL的试样溶液至滴定杯中，控制在2min内加热至沸，保持沸腾继续以1滴/2s的速度滴加试样溶液，滴定直至蓝色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积，同法平行操作三份，得出平均消耗体积(V)。

3.2 参数设置

4 结果与讨论

4.1 实验结果

（1）标定碱性酒石酸铜

式中：

X --试样中还原糖的含量（以葡萄糖糖计），单位为克每百克(g/100g)；

m₁ --碱性酒石酸铜溶液（甲、乙液各半）相当于葡萄糖的质量，单位为毫克(mg)；

m --试样质量，单位为克(g)；

F --系数，为1；

V --测定时平均消耗试样溶液体积，单位为毫升(mL)；

250 --定容体积，单位毫升(mL)。