电位滴定仪-凯氏定氮仪联用检测蛋白粉中的蛋白质含量
1.前言
所谓蛋白粉,一般是采用提纯的大豆蛋白、酪蛋白、乳清蛋白(缺乏异亮氨酸)、豌豆蛋白或上述几种蛋白的组合(如大豆蛋白、乳清蛋白和豌豆蛋白组成的复合蛋白)构成的粉剂,蛋白质是保证机体健康最重要的营养素,它是维持和修复机体以及细胞生长所必需的,不仅影响机体组织如肌肉的生长,还参与激素的产生、免疫功能的维持、其它营养物质和氧的转运以及血红蛋白的生成、血液凝结等多方面。但是蛋白质摄入过多,不但是一种浪费,而且对人体健康也是有危害的。
2.实验原理
食品中的蛋白质在催化加热条件下被分解,产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵。碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后用硫酸或盐酸标准滴定液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即为蛋白质的含量。
3.实验仪器
石墨消解炉,K9840凯氏定氮仪,T960电位滴定仪
4.实验试剂
滴定剂:C(H2SO4))=0.100mol/L, 滴定剂的浓度按照国标标定、硼酸溶液(20g/l)、甲基红-溴甲酚绿乙醇混合溶液:1:5、催化剂片(硫酸铜0.2g,硫酸钾3g)、蛋白粉(市售)
5.测定方法
1)样品制备
万分之一天平称取0.2g蛋白粉样品(精确到0.1mg),无屑称量纸包好一并投入300ml消化管中。
2)消解
消化管中加入一片催化剂片(硫酸铜0.2g,硫酸钾3g)和10ml浓硫酸,轻轻摇动使充分混合,并作空白实验。消化管架放置在石墨炉上,盖上废气罩,并打开废弃吸收系统。消化管采用曲线升温模式,200℃维持20min460℃维持60min左右。消化完成后,取出消化管,冷却至室温。
3)蒸馏
K9840凯氏定氮仪清洗空蒸结束后,按标准设置好仪器,将消化好的样品安装在仪器上蒸馏。
4)滴定
吸收液在电位滴定仪T960上用0.1mol/l的硫酸标准滴定液滴定至终点。
5.测试结果
1)参数设置
蒸馏参数设置:
![](/uploads/image/20160816/1471328860.jpg)
该蛋白粉中含氮量平均值为13.25%,蛋白质量平均值为82.80%。
7.参考文献
1) GB/T 601- 2002 化学试剂标准滴定溶液的制备[S].北京: 中国标准出版社, 2003.
2)GB 5009.5-2010 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定第一法凯氏定氮法.