电位滴定仪-凯氏定氮仪联用检测蛋白粉中的蛋白质含量

1.前言

所谓蛋白粉，一般是采用提纯的大豆蛋白、酪蛋白、乳清蛋白(缺乏异亮氨酸)、豌豆蛋白或上述几种蛋白的组合(如大豆蛋白、乳清蛋白和豌豆蛋白组成的复合蛋白)构成的粉剂，蛋白质是保证机体健康最重要的营养素，它是维持和修复机体以及细胞生长所必需的，不仅影响机体组织如肌肉的生长，还参与激素的产生、免疫功能的维持、其它营养物质和氧的转运以及血红蛋白的生成、血液凝结等多方面。但是蛋白质摄入过多，不但是一种浪费，而且对人体健康也是有危害的。

2.实验原理

食品中的蛋白质在催化加热条件下被分解，产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵。碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后用硫酸或盐酸标准滴定液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质的含量。

3.实验仪器

石墨消解炉，K9840凯氏定氮仪，T960电位滴定仪

4.实验试剂

滴定剂:C(H2SO4))=0.100mol/L, 滴定剂的浓度按照国标标定、硼酸溶液(20g/l)、甲基红-溴甲酚绿乙醇混合溶液：1：5、催化剂片(硫酸铜0.2g，硫酸钾3g)、蛋白粉(市售)

5.测定方法

1)样品制备

万分之一天平称取0.2g蛋白粉样品(精确到0.1mg)，无屑称量纸包好一并投入300ml消化管中。

2)消解

消化管中加入一片催化剂片(硫酸铜0.2g，硫酸钾3g)和10ml浓硫酸，轻轻摇动使充分混合，并作空白实验。消化管架放置在石墨炉上，盖上废气罩，并打开废弃吸收系统。消化管采用曲线升温模式，200℃维持20min460℃维持60min左右。消化完成后，取出消化管，冷却至室温。

3)蒸馏

K9840凯氏定氮仪清洗空蒸结束后，按标准设置好仪器，将消化好的样品安装在仪器上蒸馏。

4)滴定

吸收液在电位滴定仪T960上用0.1mol/l的硫酸标准滴定液滴定至终点。

5.测试结果

1)参数设置

蒸馏参数设置：

该蛋白粉中含氮量平均值为13.25%，蛋白质量平均值为82.80%。

7.参考文献

1) GB/T 601- 2002 化学试剂标准滴定溶液的制备[S].北京: 中国标准出版社, 2003.

2)GB 5009.5-2010 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定第一法凯氏定氮法.