凯氏定氮法(半微量)测定胰激肽原酶的氮含量

1 前言

滴眼液中氮含量约为0.01%左右，它的测定要求按照药典第二部化药附录VIID 氮测定法第二法(半微量法)。由于样品中存在大量水分，消解过程需缓慢升温;且样品消解加入硫酸仅2ml，也是一个消解的难题。

2 实验部分

2.1仪器和试剂

Hanon K1100F全自动凯氏定氮仪

Hanon SH420F石墨炉消解仪

98%硫酸

硫酸钾

30%硫酸铜

40%氢氧化钠

2%硼酸

0.0104mol/L硫酸滴定液

2.2 实验步骤

2.2.1取样

精确称取10ml样品，石墨炉上150℃挥去大部分水分。消化管冷却后，加入0.3硫酸钾和30%硫酸铜5滴，2ml浓硫酸。并做空白实验。

2.2.2 消解

消化管上方加盖玻璃小漏斗，消解温度设置如下：

200℃ 30min

300℃ 30min

400℃ 90min

2.2.3 蒸馏滴定计算

采用边蒸馏边滴定模式，凯氏定氮仪仪器参数设置为：硼酸(含指示剂)：10ml;碱：10ml;稀释水：10ml;蒸馏：5min;滴定酸浓度：0.0104mol/L。

测试结果如下：

空白体积0.3062ml

相对标准偏差(RSD)=标准偏差(SD)/计算结果的算术平均值(X)*100%

3 结果与讨论

样品消解：先挥去大部分水分，防止上冲;为避免硫酸过量损失，防止消化管烧干，可用玻璃漏斗代替排废罩。消解过程中注意观察，消解澄清后30min停止加热。从样品测定结果来看平行性良好，符合药典要求。

参考文献

2015版中国药典第二部化药附录VIID 氮测定法第二法(半微量法)