凯氏定氮法测定小米中蛋白质含量
前言
小米,原名:粟,也称作粱、狗尾草、黄粟、粟米。蛋白质含量在不同类型的小米中变动很大,一般介于5%—20%之间,平均为10%—12%。小米中蛋白质的质量常优于小麦、稻米和玉米,但是必需氨基酸中的赖氨酸含量低。现在我们根据《GB 5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》对小麦中的蛋白质进行测定。
实验部分
1.1实验原理
小米中的有机态氮在浓硫酸和催化剂的共同作用下,转化为氨态氮。加碱蒸馏,使氨析出,用硼酸吸收后,再以盐酸或硫酸标准滴定液进行滴定。
1. 2 仪器与设备
K1160 全自动凯氏定氮仪
SH 420F 石墨消解仪
1. 3 试剂与耗材
实验中涉及到的试剂,均为优级纯或分析纯;实验用水为无氨蒸馏水。
1.3.1 盐酸或硫酸溶液:c(H + )= 0 . 1mol /L ,标准滴定液。
1. 3 . 2 硼酸溶液:质量分数 2% 。
1. 3. 3 氢氧化钠溶液:质量分数 40% 。
1. 3. 4 溴甲酚绿 - 甲基红混合指示剂:将溴甲
酚绿乙醇溶液 (1g/ L) 与甲基红乙醇溶液(1g/ L) 按 5 : 1 体积比临时混合摇匀备用。
1. 3 . 5 催化剂片: 3g 硫酸钾和 0. 2g 硫酸铜混合均匀压片
1. 4 实验过程
1 . 4 . 1 取样
将小米研磨后,准确称量0.5g 的样品(精确至 0 . 1mg ),加催化剂一片(或硫酸钾 5g 与硫酸铜 0 . 5g) ,再沿瓶壁滴加硫酸 8.5mL 。
1 . 4 .2 消解
利用石墨消解炉进行消解,将消化管放在石墨炉上,盖上排气罩,连接废气吸收系统,设定消解温度参数如下表:
消化完毕后,将消化管取下冷却。
1 . 4 . 3 上机测试
待消化管内溶液冷却至室温后,将消化管放置于定氮仪上,开始蒸馏滴定。定氮仪设置程序如下:
式中:M-标准酸摩尔浓度(mol/L)
W-样品质量(g)
V0-空白样滴定标准酸消耗量(mL)
V-样品滴定标准酸消耗量(mL)
5.83-样品蛋白系数
结果与讨论