凯氏定氮法测定医用几丁糖中蛋白质含量
前言
医用几丁糖是由蟹壳提纯的高分子化合物几丁质,经脱N—乙酰基再深加工后制成的一种聚氨基葡萄糖,是一种具有良好生物相容性、生物可降解性及生物学活性的医用高分子多糖类物质,可以有效防止术后组织粘连。
实验部分
1. 1仪器与设备
K1100F 全自动凯氏定氮仪
SH 420F 石墨消解仪
1. 2试剂与耗材
实验中涉及到的试剂,均为优级纯或分析纯;实验用水为无氨蒸馏水。
1. 2 . 1 盐酸或硫酸溶液:c(H + )= 0 . 1mol /L ,标准滴定液。
1. 2 . 2 硼酸溶液:质量分数 2% 。
1. 2. 3 氢氧化钠溶液:质量分数 40% 。
1. 2. 4 溴甲酚绿 - 甲基红混合指示剂:将溴甲
酚绿乙醇溶液 (1g/ L) 与甲基红乙醇溶液(1g/ L) 按 5 : 1 体积比临时混合摇匀备用。
1. 2 .5 催化剂片: 3g 硫酸钾和 0. 2g 硫酸铜混合均匀压片
1.3 实验过程
1 . 3 . 1 取样
称量 1.5g 的样品(精确至 0 . 1mg ),加催化剂一片(或硫酸钾 0.3g 与硫酸铜 0 . 02g) ,再沿瓶壁滴加硫酸 4 . 0mL 。
1 . 3 .2 消解
利用石墨消解炉进行消解,将消化管放在石墨上,盖上排气罩,连接废气吸收系统,设定消解温
度参数如下表:
![](/uploads/image/20171123/1511408093.jpg)
消化完毕后,将消化管取下冷却。
1 . 4 . 3 上机测试
待消化管内溶液冷却至室温后,将消化管放置于定氮仪上,开始蒸馏滴定。定氮仪设置程序如下:
式中:M-标准酸摩尔浓度(mol/L)
W-样品质量(g)
V0-空白样滴定标准酸消耗量(mL)
V-样品滴定标准酸消耗量(mL)
6.25-样品蛋白系数
结果与讨论