凯氏定氮法测定医用几丁糖中蛋白质含量
1前言
医用几丁糖是一种具有良好生物相容性、生物可降解性及生物学活性的医用高分子多糖类物质,可以有效防止术后组织粘连。常规的蛋白质测定方法有凯氏定氮法,分光光度法以及燃烧法,其中以凯氏定氮法应用最为广泛。但传统的玻璃仪器具有操作繁琐,耗时长,危险性高等缺点。本文采用《中国药典》2015年版中氮测定法第三法以全自动凯氏定氮仪进行实验,操作简单,测得结果平行性良好。
2 仪器与试剂
2.1仪器
K1100F全自动凯氏定氮仪,SH420F石墨消解仪
2.2试剂
硫酸(分析纯)、硼酸(分析纯)、氢氧化钠(分析纯)、溴甲酚绿-甲基红混合指示剂、催化剂片(3g硫酸钾和0.2g硫酸铜混合均匀压片)、0.1mol/L硫酸标准滴定液等。
3实验方法
3.1取样
称取医用几丁糖样品1.5g(精确至0.1mg),加催化剂一片(或硫酸钾3g与硫酸铜0.2g),再加硫酸10mL。同时做空白实验。
3.2消解
利用石墨消解炉进行消解,将消化管放在石墨上,盖上排气罩,连接废气吸收系统,消化完毕后,将消化管取下冷却。消解过程设定消解温度参数如下表:
![](/uploads/image/20180808/1533697558.jpg)
式中:C-标准酸摩尔浓度(mol/L)
W-样品质量(g)
V0-空白样滴定标准酸消耗量(mL)
V-样品滴定标准酸消耗量(mL)
6.25-样品蛋白系数
4.2实验结论
通过以上测得数据可知,利用全自动凯氏定氮仪测定医用几丁糖中的蛋白质含量平行性良好,且具有操作简单,安全性高,节省人力等优点。
参考文献
《中国药典》2015年版第四版0704氮测定法 第三法