凯氏定氮仪测定功能性添加剂中蛋白质的含量

1 前言

功能性添加剂主要成分为酪蛋白酸钠和黄原胶、单甘酯、卡拉胶等。酪蛋白酸钠以脱脂奶粉为原料，用凝乳酶或酸(盐酸、硫酸等)沉淀法制得生酪蛋白，经脱水、膨润、中和，再喷雾干燥或冻干制得。酪蛋白酸钠含有人体所需的各种氨基酸，营养价值很高，也可作为营养强化剂食用。本实验原理为样品与浓硫酸和硫酸铜、硫酸钾一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵，然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后以硫酸标准滴定溶液滴定，最后计算得出蛋白质的含量。

2 仪器与试剂

2.1仪器

K1100F全自动凯氏定氮仪，SH420F石墨消解仪

2.2试剂

浓硫酸，20g/L硼酸溶液，溴甲酚绿-甲基红混合指示剂，40%氢氧化钠。

3 实验方法

3.1取样

称取样品0.3g（精确值0.1mg）左右，使用称量纸包好放入消化管内。加入混合催化剂3gK2SO4、0.2gCuSO4，加入12ml浓硫酸。

3.2消解

利用石墨消解炉进行消解，将消化管放在石墨炉上，盖上排气罩，连接废气吸收系统，消化完毕后，将消化管取下冷却至室温。消化过程采用曲线升温模式，设定消解参数：

3.3测试

将消化管放置于定氮仪上。定氮仪设置程序如下：

4 结果与讨论

4.1实验结果

4.2结论

以上实验数据显示，使用K1100F凯氏定氮仪测定功能性添加剂中的粗蛋白质数据平行性明显优于《GB 5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质含量测定》标准要求的绝对差值不得超过算术平均值的10%。

参考文献

[1] GB 5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定[S].

注意事项

测试样品为粉末状固体，为了保证取样均匀性，取样前应将样品充分混合均匀。