凯氏定氮仪测定黑豆中粗蛋白的含量
1 前言
黑豆营养丰富，含有蛋白质、脂肪、维生素、微量元素等多种营养成分，同时又具有多种生物活性物质。黑豆浆不像黄豆性冷，喝多了也不会拉肚子，还能提供食物中粗纤维，促进消化，防止便秘发生。本实验原理为粉碎的黑豆粉与浓硫酸和硫酸铜、硫酸钾一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵，然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后以硫酸标准滴定溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质的含量。
2 仪器与试剂
2.1仪器
K1100F全自动凯氏定氮仪，SH420F石墨消解仪
2.2试剂
硫酸（分析纯），20g/L硼酸溶液，溴甲酚绿-甲基红混合指示剂，40%氢氧化钠，混合催化剂压片（3gK2SO4、0.2gCuSO4），0.1mol/L硫酸标准滴定液。
3 实验方法
3.1取样
样品粉碎，过筛，在110 ℃鼓风干燥箱内干燥1-2 h，准确称取样品0.5g（精确值0.1mg）左右，加入消化管。再加入混合催化剂3gK2SO4、0.2gCuSO4，加入10mL浓硫酸。
3.2消解
利用石墨消解炉进行消解，将消化管放在石墨炉上，盖上排气罩，连接废气吸收系统，消化完毕后，将消化管取下冷却至室温。消化过程采用曲线升温模式，设定消解参数：
4.2结论
以上数据显示，使用K1100F凯氏定氮仪测定黑豆中的蛋白质含量，所得结果误差均在允许范围之内。
参考文献
[1] GB/T 5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质含量检测[S]
注意事项
实验样品为粉碎后的黑豆粉，为粉末状固体，取样前应将样品充分混合均匀。
