凯氏定氮仪测定小牛血液中的挥发性盐基氮

1 前言

牛肉含有丰富的蛋白质，氨基酸组成比猪肉更接近人体需要，能提高机体抗病能力，对生长发育及手术后、病后调养的人在补充失血、修复组织等方面物别适宜。对于人的身体健康，牛肉可谓是一“宝”，那大家知道牛身上的另一“宝”吗？准确地说是小牛身上的一“宝”，那就是小牛的血。主要是小牛血去蛋白提取物，内含多种游离氨基酸和肽。能促进细胞对葡萄糖和氧的摄取与利用。在低血氧以及能量需增加等情况下，可以促进能量代谢，增加供血量。
      挥发性盐基氮（TVB-N）指动物性食品由于酶和细菌的作用，在腐败过程中，使蛋白质分解而产生氨以及胺类等碱性含氮物质。此类物质具有挥发性，其含量越高，表明氨基酸被破坏的越多，因此营养价值大受影响。

2 实验部分

2.1原理

根据《GB/T 5009.44-2003 肉与肉制品卫生标准的分析方法》进行测定。挥发性盐基氮具有挥发性，加入碱性溶液后可以被蒸出， 用标准酸溶液滴定计算含量。

2.2 仪器与试剂、器具

2.2.1 K1100F全自动凯氏定氮仪(济南海能仪器股份有限公司)。

2.2.2 SH420F石墨消解仪(济南海能仪器股份有限公司)。

2.2.3 硼酸分析纯，质量分数2%。

2.2.4 氢氧化钠分析纯，质量分数40%。

2.2.5 亚甲基蓝-甲基红混合指示剂 将亚甲基蓝乙醇溶液(1g/L)与甲基红乙醇溶液(2g/L)按1：1体积比临时混合摇匀备用。

2.2.6 氧化镁 分析纯

2.2.7 100μL-1000μL移液枪

2.3 实验部分

2.3.1取样：精确量取5ml样品至消化管中.加入20ml水摇匀后。

2.2.2加入1g氧化镁固体后，迅速消化管放置于定氮仪上。

2.3.3 定氮仪设置程序如下：

稀释水：30ml

硼酸：25ml

蒸馏时间：7min

2.3.4 仪器自动滴定并给出计算结果。

氮含量      

式中：M-标准酸摩尔浓度（mol/L)

W-样品质量（g）

V0-空白样滴定标准酸消耗量（mL）

V-样品滴定标准酸消耗量（mL），精确到小数点后四位

3 结果与讨论

氮含量      

式中：M-标准酸摩尔浓度（mol/L)

W-样品质量（g）

V0-空白样滴定标准酸消耗量（mL）

V-样品滴定标准酸消耗量（mL），精确到小数点后四位

注意：

（1）如果测全血，储存时应放置在低温环境下，以防止凝结成块。

（2）由于挥发性盐基氮具有一定的挥发性，建议现用现取，以免造成氮损失。

（3）氧化镁虽起到一定的消泡作用，但如果在蒸馏过程中产生大量泡沫，可按实际情况增加氧化镁的量，或直接加入少量消泡剂。

（4）氧化镁的加入量可根据客户需要自行调整。