全自动机械臂固相萃取仪－高效液相色谱法检测鸡蛋中氟虫腈残留量

1 前言

氟虫腈是一种苯基吡唑类杀虫剂、杀虫谱广，其作用机制在于阻碍昆虫γ-氨基丁酸控制的氯化物代谢，因此对蚜虫、叶蝉、蝇类等重要害虫有很高的杀虫活性。采用海能全自动固相萃取仪-高效液相色谱法进行检测动物源性食品中磺胺类药物残留，有效的缩短样品中目标物的固相净化所需要的时间，提高了工作效率，也节约了人力；且能精准的控制上样、淋洗、洗脱等溶剂流速，提高了样品目标物的回收率。

2 仪器与试剂

2.1 仪器

SPE400全自动机械臂固相萃取仪；HN200多功能氮吹仪；气相色谱-质谱仪：配有负化学源；绞肉机；粉碎机；分析天平；离心机；均质器；其他常规玻璃仪器；滤膜（有机相，0.22μm）。

SPE 400全自动机械臂固相萃取仪

2.2试剂及耗材

实验用水应符合GB/T6682中三级用水的规格，使用试剂除特殊说明外，均为分析纯。

正己烷（色谱纯）；乙腈（色谱纯）；丙酮（色谱纯）；

氯化钠：650℃灼烧4h，置于干燥器中冷却，备用。

丙酮+正己烷（3+7）：取300ml丙酮，加入700ml正己烷，摇匀备用。

PSA固相萃取小柱：丙基乙二胺键合硅胶，500mg/3ml。

氟虫腈标准品：纯度≧96.5%。

氟虫腈标准溶液的配制：准确称取适量标准品，用少量的丙酮溶解，并以丙酮配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备液。根据需要再用丙酮+正己烷稀释成适当浓度的标准工作溶液。保存于-18℃环境下。

3实验方法

3.1取样

取适量鸡蛋样品进行匀浆，以备待用。

3.2提取

称取匀浆后的鸡蛋试样5g于50ml具塞离心管中，加入5ml水，准确加入20ml乙腈，用匀浆机匀浆10min。再加入2.5g氯化钠，剧烈振荡10min，3000r/min，离心10min，取上清液备用。

3.3液-液分配净化

取上层清液10ml转移至50ml具塞离心管中，加入10ml正己烷，振摇3min，静置分层，弃去上层正己烷相，再用10ml正己烷重复此操作一次，弃去正己烷；下层乙腈相收集，并在氮吹仪上以40℃浓缩近干，加入1.0ml丙酮+正己烷（3+7）溶解残渣，作为备用液。

3.4固相萃取小柱净化（PSA柱）

表1 固相净化条件

进样口温度：250℃；

色谱-质谱接口温度：280℃；

载气：氦气，纯度≧99.999%，恒压模式，柱头压1.45MPa；

进样量：1μL；

进样方式：无分流进样，0.65min后开阀；

电离方式：负化学电离；

离子源温度：150℃；

四级杆温度：150℃；

反应气：甲烷，纯度≧99.99%；

测定方式：选择离子监测方式；

选择监测离子（m/z)：定量366，定性333、368、400；

溶剂延迟：4.0min。

3.6 气相色谱-质谱检测及确证

根据样液中被测物含量情况，选定浓度相近的标准工作溶液，对标准工作溶液与样液等体积参插进样测定，标准工作溶液和待测样液中氟虫腈的响应值均应在仪器检测的线性范围内。

如果样液与标准工作溶液的选择离子色谱图中，在相同保留时间有色谱峰出现，并且在扣除背景后的样品质谱图中，所选离子均出现，所选择离子的丰度比与标准对应离子的丰度比，其值在允许范围内（允许范围见表1）。在测试条件下，氟虫腈保留时间是11.1min，其监测离子（m/z)为m/z366、333、368、400（其丰度比为100:27:70:35）对其进行确证；根据定量离子m/z366对其进行外标法定量。

表1 使用定性气相色谱-质谱时相对离子丰度最大容许误差

式中：

X——试样中氟虫腈残留量，单位为mg/Kg;

h——样液中氟虫腈的色谱峰高，单位为mm;

hs——标准工作液中氟虫腈的色谱峰高，单位为mm；

C——标准工作液中氟虫腈的浓度，单位为μg/mL;

V——样液最终定容体积，单位为mL;

M——最终样液所代表的试样质量，单位为g。

参考文献

[1] SN/T 1982-2007 进出口食品中氟虫腈残留量检测方法 气相色谱-质谱法[S].