全自动机械臂固相萃取仪－高效液相色谱法检测水果中阿维菌素残留量
1 前言
阿维菌素类农药是由链霉菌菌株代谢产生的一种大环内酯类抗生素，主要包括阿维菌素、伊维菌素、依普菌素和甲氨基阿维菌素苯甲酸盐等，是一类具有高选择性、高杀虫活性的新型农畜两用药。目前广泛应用于蔬菜、水果中菜青虫、潜叶蛾和各种抗性蚜虫等的防治。世界卫生组织将阿维菌素类农药分级为高毒化合物。采用海能全自动固相萃取仪-高效液相色谱法进行检测水果中阿维菌素农药残留，有效的缩短样品中目标物的固相净化所需要的时间，提高了工作效率，也节约了人力；且能精准的控制上样、淋洗、洗脱等溶剂流速，提高了样品目标物的回收率。
2 仪器与试剂
2.1仪器
SPE400全自动机械臂固相萃取仪；HN200多功能氮吹仪；高效液相色谱仪；分析天平；组织捣碎机；振荡器；布氏漏斗；真空泵；其他常规玻璃仪器；滤膜（有机相，0.45μm）。
2.2试剂及耗材
实验用水应符合GB/T6682中一级用水的规格，使用试剂除特殊说明外，均为色谱纯。
丙酮（色谱纯）；甲醇（色谱纯）；阿维菌素标准溶液：100μg/mL，甲醇作为溶剂。
固相萃取柱：C18，60mg/3ml。
3 实验方法
3.1取样
将水果样品用小刀将其切碎，再用组织捣碎机将其捣碎，装入洁净容器内。
3.2提取
称取捣碎后试样约20g于具塞锥形瓶中，加入50mL丙酮，于振荡器上真当30min，用布氏漏斗抽滤，再用20mL丙酮洗涤具塞锥形瓶过过滤的残渣，并重复一次。合并提取液，用氮吹仪定容约2mL。
3.3固相萃取柱净化（C18柱）
表1 固相净化条件
3.4浓缩
用氮吹仪吹至近干，准确加入1.0mL甲醇溶解残渣，再用0.45μm滤膜过滤，待测。
3.5色谱测定条件
色谱柱：ODS-C18，粒径5μm，柱长125mm，内径4.6mm；
流速：1.0mL/min；
检测波长：245nm；
柱温：40℃；
进样体积：20μL。
流动相：甲醇：水=（90+10，V/V），梯度如下表：
3.6定性分析和定量分析
以目标化合物的保留时间定性；以外标一点法定量（即选定峰高相近的标准工作液和样品溶液中阿维菌素响应值，并且在仪器检测线性范围内），并做空白试验（不加样品）。
4 实验结果
4.1计算公式
X——试验中阿维菌素残留量，mg/kg;
h——样品中阿维菌素峰高，单位为mm;
hs——标准工作溶液中阿维菌素峰高，单位为mm;
c——标准工作溶液中阿维菌素浓度，单位mg/L；
V——样液最终定容体积，单位mL；
m——最终样液代表的试样量，单位为g。
4.2结论
采用SPE400全自动机械臂固相萃取仪可以快速对样品提取液进行净化和富集，可做到无人看守、批量处理，省去实验员繁琐的加液取液等人工操作，方便快捷。采用SPE400全自动机械臂固相萃取仪对样品提取液可以精准的控制进样、加液等流速，有利于固相小柱进行萃取分离，从而实现较好的样品检测重复性。
参考文献
[1]《GB 23200.19-2016 食品安全国家标准 水果和蔬菜中阿维菌素残留量的测定》[S].
