全自动机械臂固相萃取仪-高效液相色谱法检测水质中苯并(a)芘残留量
1 前言
水是生命之源,人们生活和生产中都离不开水,水质的优劣与人类的健康息息相关。多环芳烃(PAHs)是指两个或两个以上的苯环按线性、角状或簇状方式稠合在一起的一类中性或非极性有机化合物,可分为芳香稠环型及芳香非稠环型。PAHs在环境中含量甚微但分布广泛,一些PAHs中除含有致癌和突变的成分外,还含有多种促进致癌的物质,对人体健康产生很大的威胁。采用海能全自动固相萃取仪-高效液相色谱法进行检测水质中苯并(a)芘农药残留,有效的缩短样品中目标物的固相净化所需要的时间,提高了工作效率,也节约了人力;且能精准的控制上样、淋洗、洗脱等溶剂流速,提高了样品目标物的回收率。
2 仪器与试剂
2.1仪器
SPE400全自动机械臂固相萃取仪;HN200多功能氮吹仪;高效液相色谱仪;分析天平;其他常规玻璃仪器;滤膜(有机相,0.22μm)。
2.2试剂及耗材
实验用水应符合GB/T6682中三级用水的规格,使用试剂除特殊说明外,均为色谱纯。
正己烷(色谱纯);乙腈(色谱纯);甲醇(色谱纯);十氟联苯(纯度:99%);二氯甲烷(色谱纯);硫代硫酸钠。
固相萃取柱:C18,1000mg/6ml。标准溶液:苯并芘100μg/mL,乙腈作为溶剂。
无水硫酸钠:在400℃下烘烤2h,冷却后,贮于磨口玻璃瓶中密封保存。
氯化钠:在400℃下烘烤2h,冷却后,贮于磨口玻璃瓶中密封保存。
20.0mg/L苯并芘标准溶液:质量为200gm/L的乙腈溶液,取其1mL于10mL容量瓶取中,用乙腈稀释至刻度即可,在4℃下冷藏。
1000μg/mL十氟联苯标准贮备溶液:称取十氟联苯0.025g,于25mL容量瓶中,用乙腈溶解并稀释至刻度即可。
淋洗液:二氯甲烷/正己烷(1+1)混合溶液(V/V)。
干燥柱:长250mm,内径10mm玻璃柱;柱下端放入玻璃纤维,加入10g无水硫酸钠。
3 实验方法
3.1取样
采集样品于预先洗净烘干的采样内,并注满。若水样中存在残余氯,则需加入在每升样品中加入80mg硫代硫酸钠除氯。
3.2样品制备
在水样中加入5g氯化钠和10ml甲醇,及50μL十氟联苯溶液,混匀备用。
3.3固相萃取柱净化(C18柱)
表1 固相净化条件
3.4脱水及浓缩
先用10mL二氯甲烷预洗干燥柱,加入上述洗脱液过柱,再加入2mL二氯甲烷洗柱,收集流出液。用氮吹仪进行浓缩至1.0mL,加入乙腈3mL,再次浓缩至0.5mL以下,定容至0.5mL,待测。
3.5色谱测定条件
色谱柱:ODS,粒径5μm,柱长250mm,内径4.6mm;
流速:1.2mL/min;
进样体积:10μL。
流动相:A乙腈;B水,梯度如下表:
表2 梯度表
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检测波长:苯并(a)芘 最大吸收波长295nm。
3.6标准曲线的绘制
取一定量苯并芘标注使用液和十氟联苯标准使用液于乙腈中,制备浓度分别为0.1、0.5、1.0、5.0、10.0μg/mL,贮存在棕色小瓶中,于冷暗处存放。将5种浓度的标准使用液通过定量环注入10μL进入液相色谱,得到各不同浓度的苯并芘色谱图。以峰面积为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。
3.7样品及空白的测定
取同样量的样品注入高效液相色谱仪中,记录色谱峰的保留时间和峰面积。对应标准曲线,得到样品中苯并芘的含量。在分析样品的同时,以蒸馏水代替水样,作为空白试验,按照样品测定的相同步骤进行分析,检测分析果过程中是否有污染。
4 实验结果
4.1计算公式
ρ——样品中苯并芘的质量浓度,μg/L;
ρi——从标准曲线中查的组分的质量浓度,μg/L;
V1——萃取液浓缩后的体积,μL;
V——水样体积,mL.
4.2结论
采用SPE400全自动机械臂固相萃取仪可以快速对样品提取液进行净化和富集,可做到无人看守、批量处理,省去实验员繁琐的加液取液等人工操作,方便快捷。采用SPE400全自动机械臂固相萃取仪对样品提取液可以精准的控制进样、加液等流速,有利于固相小柱进行萃取分离,从而实现较好的样品检测重复性。
参考文献
[1]《HJ 478-2009 水质 多环芳烃的测定 液液萃取和固相萃取高效液相色谱法》[S].