液相色谱法检测动物油中苯并芘

1 前言

苯并芘是最具代表性的国际公认的强致癌物，几乎不溶于水，可溶于苯、甲苯和环己烷，微溶于乙醇和甲醇。可通过呼吸、摄入和接触等途径进入人体，可损伤生殖系统，易导致皮肤癌、肺癌、上消化道肿瘤、动脉硬化和不育症等疾病。苯并芘在自然界中广泛存在，在油料加工和油脂生产中的不当操作以及苯并芘的亲酯能力可能使其污染食用油。

2 实验部分

2.1 实验原理

样品经溶剂溶解，通过氧化铝柱吸附，用洗脱剂洗脱苯并(a)芘，用反相高效液相色谱分离，荧光检测器检测。

2.2 试剂和材料

高纯水

石油醚

乙腈

四氢呋喃

甲苯

无水硫酸钠

中性氧化铝

2.3 仪器和设备

玻璃层析柱

恒温水浴

旋转蒸发仪

Hanon LC7000高效液相色谱仪

2.4 试样的制备

2.4.1 样品的净化

用玻璃烧杯称取约0.4g试样，精确到0.001g，用2ml石油醚溶解稀释。

向层析柱中加一半高度的石油醚，快速称取22g氧化铝与小烧杯中，立即转移到层析柱中，轻轻敲打层析住，使氧化铝均匀沉淀。再装入一层约30mm高度的无水硫酸钠。向层析柱中移入样品溶液，加80ml石油醚洗脱，洗脱液前20ml弃去，换用圆底烧瓶收集其余洗脱液。

2.4.2 浓缩

将收集的洗脱液在65℃的水浴中旋转蒸发至约1ml，移至玻璃样品瓶中用氮吹仪吹干，4℃储存备用。

2.5 样品的测定

2.5.1 色谱条件

a)保护柱：Lichrosorb RP-C18，4.6mm×75mm，粒度5μm;

b)色谱柱：多环芳烃分析柱，4.6mm×250mm;

c)进样量：20μl;

d)流动相：乙腈：水=88:12

e)流速：1ml/min;

f)荧光检测器：发射波长：406nm，激发波长：384nm (狭缝均为10nm)

2.5.2 样品分析

向装有待测试样的玻璃样品瓶中加入乙腈溶液溶解样品，经孔径为0.45μm的有机滤膜过滤后，待上机测试。

2.5.3 液相图谱