脂肪测定方法的几种优缺点解析

1 前言

粗脂肪是饲料中的重要营养素，饲料中的粗脂肪含量是评价饲料质量的标准之一。饲料脂肪的测定，通常是将试样放在特定的仪器中，用脂溶性溶剂(乙醚、氯仿、石油醚等)反复浸提试样、称量提取物的重量，因在提取物中除脂肪外，还有有机酸、磷脂、脂溶性维生素、叶绿素等，所以提取物称为粗脂肪或乙醚提取物。本文就目前应用较多的几种方法进行分析，比较其各自的优缺点，以为读者选择恰当测定方法提供一点帮助。

基本原理：根据饲料中的油脂均可溶解于乙醚中，故用无水乙醚反复浸提饲料中的脂肪，使脂肪全部溶解于乙醚中，然后将乙醚蒸发.瓶中所剩残渣的重量即为饲料的粗脂肪含量。

2 油重法(或抽提瓶增重法)

2.1 原理

试样在抽提管中反复抽提，直到脂肪抽提干净，抽提瓶的增重即为样品所含粗脂肪重量。

2.2 材料方法

索氏脂肪提取器、分析天平、电热恒温鼓风干燥箱、水浴锅、乙醚等。

索氏提取器应干燥无水：抽提瓶在105±2℃烘箱中烘干60min，干燥器中冷却30min，再烘干30min，同样冷却称重。

称取试样l～5g(置于滤纸筒中或用滤纸包好.滤纸包应低于提取器虹吸管的高度，并应全部浸泡于乙醚中，将滤纸包放人抽提管，在抽提瓶中加无水乙醚，在60～75℃的水浴加热，70次为抽提终点(或以抽提管流出的乙醚挥发后不留下油迹为抽提终点)。

取出试样，仍用原提取器回收乙醚直至抽提瓶内的乙醚被全部收完.取下抽提瓶。在水浴锅上蒸除残留乙醚。擦净外壁，将抽提瓶放人105±2℃烘箱中烘干120min，燥器中冷却30min，称重，再烘干30min，同样冷却称重，两次质量差小于0.001g为恒重，抽提瓶前后重量之差为粗脂肪含量。

2.3 优点

2.3.1 样品含有的粗脂肪，完全被抽提瓶回收，可以进一步分析样品脂肪酸组成，及脂肪酸品。

2.3.2 整个过程在样品绝干状态下进行。实验结果产生误差的机会小。

2.4 缺点

2.4.1 长时间烘干，抽提瓶会在恒重之后又增重。主要原因是粗脂肪有可能在抽提瓶发生氧化反应而使重量增加，粗脂肪品质发生变化。

2.4.2 抽提瓶重量、体积均较大.在分析天平上称量时有一定的困难。

2.4.3 实验一次想进行多个样品。或做多组重复时，需要的提取器相应增多，不利于同时进行，在实验性教学上不方便。

2.4.4 时间长，危险大，整个实验完成大概要8h左右。乙醚有毒，易挥发，大量吸人头晕、眼酸、腹泻。有些情况下还可能燃烧。

3 残余法(或滤纸包减重法)

3.1 原理

试样在抽提管中反复抽提。直到脂肪抽提干净，滤纸包的减重即为样品所含粗脂肪重量。

3.2 材料方法

同上法前半部分取出试样。仍用原提取器回收乙醚直至抽提瓶内的乙醚被全部收完，将样品包放人105±2℃烘箱中烘干120min。燥器中冷却30min，称重，再烘干30min，同样冷却称重，两次质量差小于0.001g为恒重，滤纸包前后重量之差为样品粗脂肪含量。

3.3 优点

3.3.1 一个抽提管可以盛多个样品包(只需在样包上用铅笔做出标记即可)，有利于同时进行多个样品，或进行多组重复。适合教学实验用。

3.3.2 滤纸包中的样品经过脱脂处理，可以进行其他相关养分的分析测定。省去再脱脂的步骤。

3.4 缺点

3.4.1 滤纸包在称量过程中，由于是绝干状态。很容易吸潮，在分析天平上很难平衡。对实验结果造成影响。，

3.4.2 实验不能进一步分析样品中粗脂肪的品质及组成.因为不能清楚粗脂肪来源于哪个样包，哪种样品。

3.4.3 同2.4.4。

4 滤袋技术测定粗脂肪

滤袋技术(Filter Bag Technology，FBT)用于批量分析饲料中的纤维含量的推广。使ANKOM Technology在1993年准确测定酸性洗涤纤维(Acid Detergent Fiber，ADF)，中性洗涤

纤维(Neutral Detergent Fiber，XDF)和粗纤维(Crude.Fiber;CF)。基于在纤维分析方面已获得的经验，ANKOM Technology新近又开发了一项快速批抽提脂肪技术(Accelerated Batch Extraction，ABE)、ANKOM xT20脂肪分析仪是采用ANKOM技术开发的一项使用普通溶剂快速抽提食品和饲料脂肪的新技术而研制成的。

4.1 原理

ABE的原理十分简单。样品被分装在一种用特殊材料制作的滤袋中，在溶剂的作用下，脂肪溶解透出滤袋。而样品基质颗粒不能通过滤袋而留在滤袋中.从而实现脂肪与样品基质的分离。

4.2 材料方法

ANKOM X120脂肪分析仪、XT20滤袋、石油醚、封口机称取1～39代表性样品于已知重量的XT20滤袋中，封口。将盛有样品的滤袋摆放在XT20样品架上。将XT20样品架放入分析仪的抽提缸中。按UD按扭关闭抽提缸盖。从操作控制台(OperatorControlStation，OCS)上选择程序方式。按“Auto Star”自动开始。一旦一个程序或者手动输入设定被选中。仪器会开始所有的所需步骤。当抽提过程完成后。XT20—OCS将显示“Test Complete—Remove Sample”(测试结束，移去样品)。将滤袋置于100℃条件下干燥lh，并称重。滤袋前后重量之差即为样品粗脂肪含量。

4.3 优点

4.3.1 高效。一次能用不同的方式完成20个样品的抽提，多数情况下，30～50min内完成抽提，适合要求准确、精密和快速的测定粗脂肪的实验室采用。

4.3.2 安全，使石油醚代替乙醚，沸点升高，每个操作环节都有安全保证装置，不易发生爆炸、燃烧。

4.4 缺点

该套仪器设备，目前价格昂贵，国内只有少数科研院所有，不易在大规模的饲料分析实验中采用。

5 Hanon脂肪测定仪测

5.1 原理

仍然是经典的索氏提取法.但又将浸提过程分为高温沸腾浸提和冲洗两个步骤。浸提时间大为缩短。

5.2 材料方法

海能SOX500型脂肪测定仪(配滤纸简)，分析天平，烘箱，无水乙醚。根据样品的脂肪含量，准确称取过40目筛的样品2～5g，放人滤纸筒内，烘干样品，把滤纸筒放到脂肪测定仪中。样品提取杯中加人50mL无水乙醚，放到仪器的加热板上。压下连接手柄，使提取杯与回流器密封连接。接通冷凝水。将滤纸筒通过滑杆放人提取杯中，打开电源，5min内乙醚沸腾，样品进行高温浸提，提取lh后，拉动滑杆，将滤纸筒从提取杯中提升出来。用回流冷凝的乙醚淋洗样品残余的脂肪30min，关闭淋洗阀门，开始回收乙醚，约5min乙醚回收完毕，取下提取杯，在105℃烘干至恒重，提取杯增重即为粗脂肪的含量。

5.3 优点

5.3.1 脂肪测定仪测定的不同样品所取得的结果来看，其精密度、准确度都很好，说明用脂肪测定仪测定的结果准确可靠。

5.3.2 用脂肪测定仪测定的速度快。当天可完成整个测定过程，取得测定结果，并且可同时测定6个试样。与经典方法比较大大提高了效率、简化了操作、降低了成本、节省了能源，能较好地满足日常生产和商贸交易工作中对脂肪含量测定的需要。